本文目录:
- 1、elisa法是什么意思?
- 2、什么是ELISA
- 3、elisa法基本原理?
- 4、如何收集细胞上清做elisa?
- 5、酶联法是什么
- 6、酶联法是什么
什么是ELISA
ELISA就是酶联免疫吸附测定,是免疫学当中的经典试验,是将可溶性的抗原或者是抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合,进行免疫反应的定性和定量检测方法。
定性检测结果是判断受检标本中是否含有待检测抗原或抗体,做出有或无的简单回答,分别用阴性、阳性表示,阳性表示该标本在该检测系统当中有反应,阴性表示无反应,定量检测操作步骤复杂,影响反应的因素较多。
elisa法基本原理?
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
进行检测时,样品中的受检物质(抗原或抗体)与固定的抗体或抗原结合。通过洗板除去非结合物,再加入酶标记的抗原或抗体,此时,能固定下来的酶量与样品中被检物质的量相关。通过加入与酶反应的底物后显色,根据颜色的深浅可以判断样品中物质的含量,进行定性或定量的分析。
如何收集细胞上清做elisa?
是培养基,但也有细胞分泌的可溶性的蛋白。所以一般大家都是需要离心的,去掉一些大分子的杂质之后再做elisa的。 elisa检测细胞上清液总细胞因子的处理实验步骤:
1、取细胞培养上清液500ul;
2、4度,6000rpm离心5-10min;
3、取上清。是细胞分泌的蛋白的话,直接在培养皿中铺入一定量的细胞,培养3天,细胞达到80-90%时,收取细胞培养上清液,离心去除沉淀,取上清测定浓度,用于ELISA检测。对照组为新鲜培养液。
酶联法是什么
酶联免疫法,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送确认实验室确认。有的医院很不负责,将初筛阳性的报告发出后就不管了,这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。祝大家。PS,第一次检测为阳性的话,一定要去确认实验室再做一次,勇敢的去面对,也许结果就不一样了。
酶联法是什么
酶联法即酶联免疫吸附试验是一种固相免疫测定技术,其先将抗体或抗原包被到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。测定时,将待检样本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应,后加入酶标抗体与免疫复合物结合,用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离的未结合成分,最后加入酶反应底物,根据底物被酶催化产生的颜色及其吸光度(A)值的大小进行定性或定量分析的方法
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